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Nature子刊新文解析結(jié)核分枝桿菌DNA修復(fù)機制，F(xiàn)IDA技術(shù)助力蛋白寡聚化研究

近日，《Naturecommunications》發(fā)表了一項關(guān)于結(jié)核分枝桿菌DNA修復(fù)機制的重要研究，揭示了DNA誘導的Ku蛋白寡聚化是細菌非同源末端連接（Non-homologousendjoining,NHEJ）修復(fù)的核心機制。在這項工作中，研究團隊借助FIDA（層流誘導分散分析）技術(shù)，在近生理溶液環(huán)境中完整解析了Ku-Mtb蛋白結(jié)合DNA進而發(fā)生寡聚化組裝的全過程，為闡明細菌NHEJ的分子機制提供了重要的實驗證據(jù)。01.研究速覽DNA雙鏈斷裂修復(fù)是細菌維持基因組穩(wěn)定的關(guān)...

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蛋白穩(wěn)定第一步：pH與緩沖液的關(guān)鍵作用與選擇指南

任何蛋白生物物理學檢測均需構(gòu)建于合格的液體體系基礎(chǔ)之上——尤其在純化、洗脫、配制及檢測環(huán)節(jié)，始終無法脫離液體環(huán)境。在液體體系內(nèi)，pH和緩沖液是兩類看似基礎(chǔ)，卻很容易帶來開發(fā)風險的核心變量。在蛋白質(zhì)制劑體系中，pH和緩沖液的作用更接近“隱形調(diào)控因子”：調(diào)整pH不單單是改變一個數(shù)值參數(shù)，還會對蛋白質(zhì)體系的電荷分布、分子間相互作用、化學反應(yīng)活性以及界面行為起到系統(tǒng)性的調(diào)控作用。緩沖液本身也不是體系的惰性背景，當研究人員調(diào)整pH或者更換緩沖體系時，往往會同時改變以下四類性質(zhì)：(1)蛋...

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凍干機的壓力控制詳解 —— 波動篇

前言冷凍干燥工藝中，產(chǎn)品溫度Tp是決定最終產(chǎn)品質(zhì)量和工藝時間的最重要因素之一。一次干燥階段，產(chǎn)品溫度（升華界面溫度）需低于其塌陷溫度Tc（無定形處方）或共晶點溫度(晶體處方)。如產(chǎn)品溫度（升華界面溫度）高于關(guān)鍵溫度，則會引起塌陷或者熔融。然而，如產(chǎn)品溫度（升華界面溫度）過低，則一次干燥時間會相應(yīng)大幅延長。一次干燥階段，產(chǎn)品溫度（升華界面溫度）每升高1℃，則一次干燥時間可縮短13%。一次干燥階段產(chǎn)品溫度既影響到產(chǎn)品最終質(zhì)量指標（水分、復(fù)溶時間、活性）又影響到凍干工藝的時長，是最...

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凍干過程中的真空控制

概要凍干過程中，真空度控制是否精準平穩(wěn)，是考察凍干機硬件能力的重要指標之一。同時，因為一次干燥時的真空度，直接影響產(chǎn)品升華界面溫度。因此精準平穩(wěn)的控制真空度，對于一次干燥過程至關(guān)重要。凍干機內(nèi)的壓力控制，可以通過兩個途徑來實現(xiàn)，滲氣（上游真空控制）和下游真空控制。本文將會詳細講解兩種方式的機械原理以及優(yōu)缺點。一、下游真空控制通過真空泵和冷井之間的閥門，對真空度進行控制：通過安裝在真空泵和冷井之間的電磁閥，對真空度進行控制。通過這個閥門的開、關(guān)來控制腔體內(nèi)的真空度。控制出來的真...

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全自動毛細管電泳分析在生物制藥質(zhì)控中的核心應(yīng)用與優(yōu)勢

生物制藥產(chǎn)品的質(zhì)量控制體系對分析技術(shù)提出嚴苛要求：必須在有限樣品量內(nèi)同時完成純度測定、電荷變異體分析、糖基化程度評估及雜質(zhì)篩查。傳統(tǒng)方法往往需要多種技術(shù)平臺組合使用，且通量難以匹配生產(chǎn)放行節(jié)奏。全自動毛細管電泳分析憑借其高分離效率、樣品用量少和自動化運行的特點，已深度嵌入生物制藥質(zhì)控流程。該技術(shù)在抗體藥物純度分析、電荷異構(gòu)體檢測以及宿主蛋白殘留監(jiān)控等環(huán)節(jié)，展現(xiàn)出區(qū)別于經(jīng)典方法學的獨特技術(shù)優(yōu)勢。一、純度分析與片段鑒定單克隆抗體及重組蛋白藥物的純度是質(zhì)控的首要指標。毛細管電泳-C...

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